透析袋的濃縮方法和存儲(chǔ)
透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀,就叫做透析袋。在生物大分子的制備過(guò)程中,除鹽、除少量有機(jī)溶劑、除去生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等都要用到透析的技術(shù)。
大多數(shù)情況下,透析袋純化的樣品會(huì)被稀釋。如果下游需要的樣品濃度比較高時(shí),可能需要對(duì)樣品進(jìn)行濃縮。本身濃縮的方法如下。
1)吹干濃縮法:將蛋白溶液裝入透析袋內(nèi),放在電風(fēng)扇下吹。此法簡(jiǎn)單,但速度慢,且溫度不能過(guò)高,不要超過(guò)15℃。
2)濃縮法:利用透析袋濃縮蛋白質(zhì)溶液是應(yīng)用較廣的一種。將要濃縮的蛋白溶液放入透析袋,結(jié)扎,把高分子聚合物如聚乙二醇(碳蠟)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在袋外即可。也可將吸水劑配成30%-40%濃度的溶液,將裝有蛋白液的透析袋放入即可。吸水劑用過(guò)后,可放入溫箱中烘干或自然干燥后,仍可再用。
透析袋的存儲(chǔ):
1)在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存條件下,保質(zhì)期一般在兩年以上。干燥的透析袋要在室溫或4℃儲(chǔ)存在聚乙烯袋中。未開封的4℃儲(chǔ)存。
2)一旦變濕,應(yīng)浸泡在溶液中,不要讓透析袋干燥。不斷干燥會(huì)造成孔隙結(jié)構(gòu)不可恢復(fù)的倒塌。
3)使用后洗凈可存于4℃蒸餾水或者30%乙醇中,確保始終浸沒(méi)在溶液內(nèi)。若長(zhǎng)時(shí)間不用,可加少量NaN2,以防長(zhǎng)菌。從此時(shí)起取用須戴手套。
主要用于更換蛋白質(zhì)的緩沖液。不需要特殊的儀器。一般用得是PEG20000進(jìn)行實(shí)驗(yàn),簡(jiǎn)單,快速,對(duì)蛋白沒(méi)什么影響。
此外,還有其他的樣品濃縮方法,如冷凍干燥濃縮法、超濾膜濃縮法等。